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絲氨酸蛋白酶純化方案

更新時(shí)間:2021-08-25 點(diǎn)擊次數(shù):1983

 

絲氨酸蛋白酶是一種種類(lèi)豐富的酶類(lèi),之所以以此命名是因?yàn)樵诿傅拇呋钚晕稽c(diǎn)上包含絲氨酸在內(nèi)的絲氨酸、組氨酸、天冬氨酸組成的催化三聯(lián)體。有些絲氨酸蛋白酶類(lèi)如凝血酶類(lèi)蛋白酶,其中包括凝血酶、組織纖維蛋白溶酶原激活劑、血纖維蛋白溶酶,它們參與凝血的發(fā)生以及炎癥應(yīng)答反應(yīng);也有些如胰蛋白酶類(lèi)的絲氨酸蛋白酶類(lèi)的參與消化的酶類(lèi),包括胰蛋白酶、彈性蛋白酶、胰凝乳蛋白酶;還有一些表達(dá)在神經(jīng)系統(tǒng)中的絲氨酸蛋白酶類(lèi),這些酶類(lèi)與神經(jīng)系統(tǒng)正常的維持或是介導(dǎo)病理情況的發(fā)生。


01 苯甲脒親和介質(zhì)

對(duì)氨基苯甲脒既是重要的化工原料、藥物中間體, 又是胰蛋白酶、尿激酶等酶的抑制劑, 它還可以作為親和色譜法中的配體和絲氨酸蛋白酶活性位置的探針,因而備受關(guān)注。月旭Benzamidine Tanrose 4FF是將對(duì)氨基苯甲脒偶聯(lián)到瓊脂糖凝膠上而制成的一種親和層析介質(zhì),可以用來(lái)純化絲氨酸蛋白酶。



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圖 1 月旭 Benzamidine Tanrose 4FF填料


02 Benzamidine Tanrose 4FF

技術(shù)參數(shù)


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03 應(yīng)用實(shí)例

層析柱:PreCot Benzamidine 4FF(5mL預(yù)裝柱)。

樣品:胰糜蛋白酶混合物;

結(jié)合緩沖液:50mM PB,50mM NaCl pH7.0;

洗脫緩沖液:0.1M GIy pH 2.7(洗脫液收集管中預(yù)先加入200μl 1M Tris-HCl pH9.0);

流速:0.7mL/min。

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04 訂貨信息


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